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临床医学
荧光定量聚合酶链反应检测输血传播病毒方法的建立及应用
[目的]建立输血传播病毒(transfusion transmitted virus,TTV)荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测方法,为快速、准确地定量检测TTV奠定基础。[方法]根据TTV ORF2区基因序列,设计并合成引物和荧光标记探针。将。PCR扩增的TTV的ORF2区基因片段克隆入载体,重组质粒经筛选、鉴定后,作为阳性模板,用于标准曲线的制定和样品检测。[结果]应用重组质粒制作的定量曲线循环阈值与模板浓度具有良好的线性关系。与定量对照曲线比较计算,10例TTV标本中TTV拷贝数为3.8×105~8.9×108拷贝/μl。[结论]检测TTV的FQ-PCR方法较常规PCR技术更为简便、快速、准确,有很好的应用前景和研究价值。
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中国中西医结合消化杂志
2004年05期
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