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生物学
人类PU.1cDNA的克隆及表达产物的生物活性
目的 :重叠聚合酶链反应 (OverlappingPolymeraseChainReactionPCR)法是在上下游引物之间设计一对碱基互补的嵌套引物 ,第一轮PCR分别扩增 5’端和 3’端片段 ,第二轮PCR以第一轮PCR的 5’端和 3’端片段混和物为模板 ,用上下游引物扩增出全长片段。该文用逆转录 -OverlappingPCR法快速高效地从前骨髓干细胞中扩增到人类PU .1全长cDNA为 44 2bp ,酶切和测序证实完全与前人报道一致。构建的真核表达质粒pcDNA3.1-hPU .1可以被特异的抗体识别 ,体外细胞株转染证实具有特异的激活启动子活性的功能。
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中国现代医学杂志
2000年11期

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