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生物学
乙肝病毒表面抗原基因在人参细胞中的表达
为获得表达乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的人参细胞系,构建携带HBsAg基因的植物细胞表达载体pBIBSa,采用以农杆菌LBA4404感染的方法,经G418筛选后得到13株具有抗性的人参细胞。提取基因组DNA进行PCR反应,其中8株得到约700bp的HBsAg基因片段;提取mRNA进行RT-PCR反应,其中6株得到约700bp的HBsAg基因片段;用ELISA方法检测HBsAg,6株均为阳性。每克人参细胞中最高含HBsAg184ng,占细胞可溶性蛋白的0.009%。免疫组化切片染色显示HBsAg主要分布在细胞膜上,少量位于细胞核中。这些结果表明人参细胞整合了HBsAg基因,并能稳定表达HBsAg。
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植物生理与分子生物学学报
2005年05期
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