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生物学
山葡萄几丁质酶基因VCH3启动子的分离及鉴定(英文)
利用接头PCR技术首次分离了长度为1 216bp 的“双优”山葡萄(Vitis amurensis Rupr.) classIII几丁质酶基因VCH3上游启动子序列(GenBank登录号AF441123),并用引物延伸方法鉴定了该启动子的转录起始位点,为5'-ATCAAGCAC-3'序列中的第二个A。序列分析结果表明,代表真核基因启动子特征的CAAT 盒和TATA 盒分别位于VCH3启动子转录起始位点上游?122和?29处。另外,在转录起始位点上游?1 181 bp 和?293 bp 处各有一个水杨酸(SA)响应的顺式作用元件TGACG。为了鉴定该启动子的功能,将该启动子连接到β-葡糖苷酸酶基因(GUS)编码区的上游构建了VCH3启动子-GUS融合基因,并用农杆菌介导叶盘转化法将该融合基因转入烟草栽培品种NC89 中。SA处理的转基因烟草根系和叶片GUS酶活性的荧光和组织化学检测结果表明VCH3启动子的驱动作用被SA诱导,因而该启动子在基因工程中将具有潜在的应用价值。
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植物生理与分子生物学学报
2005年05期
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