手机知网 App
24小时专家级知识服务
打 开
感染性疾病及传染病
恶性疟原虫组氨酸富集蛋白Ⅱ抗原基因在大肠杆菌中的表达及表达蛋白的活性鉴定研究
目的恶性疟原虫组氨酸富集蛋白Ⅱ(Histidine-richproteinⅡ,HRPⅡ)是疟原虫红内期生活史过程中从感染红细胞分泌至血浆中的水溶性抗原,是重要的诊断用抗原。本文通过实现恶性疟原虫HRPⅡ在大肠杆菌中的表达,为研制用于疟疾诊断的抗HRPⅡ单克隆抗体奠定基础。方法将含有HRPⅡ抗原基因的重组表达质粒HRPⅡ/pET8c用钙法转化大肠杆菌BL21(DE3),重组子经聚合酶链反应(PCR)和BamHI与BglⅡ双酶切鉴定。重组子HRPⅡ/pET8c/BL21(DE3)在28℃条件下,用1mMIPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western免疫印迹分析表达产物。结果成功构建HRPⅡ/pET8c重组质粒,在低温条件下经IPTG诱导,HRPⅡ呈可溶性、非融合性表达,SDS-PAGE分析表明表达产物的分子量约33kDa,薄层扫描显示表达蛋白占菌体总蛋白的20.76%。Western免疫印迹表明,表达产物能被抗HRPⅡ人工合成九肽单克隆抗体特异识别。结论恶性疟原虫HRPⅡ在原核表达系统pET8c/BL21(DE3)中获得成功表达,为基因工程大规模制备生产HRPⅡ抗原奠定基础
2 49
中国人兽共患病杂志
1999年01期

搜 索