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临床医学
可溶性白细胞介素-6受体结合链免疫放射检测方法的建立及应用
目的 建立一种可溶性白细胞介素 6受体结合链 (IL 6Rα)免疫放射检测方法。方法采用B淋巴细胞杂交瘤技术获取分泌鼠抗人可溶性IL 6Rα单抗的杂交瘤细胞株 ;经体内诱生腹水法制备单抗 ;免疫亲合层吸法纯化单抗 ;用 12 5I标记单抗后 ,采用竞争抑制分析法对单抗识别的抗原表位进行鉴定 ,选择识别不同抗原表位的 2株单抗H12 6和SI10分别作为包被单抗和检测单抗 ,建立双单抗夹心的可溶性IL 6Rα免疫放射检测方法。分析该检测方法与可溶性IL 6Rα相关的细胞因子白细胞介素 6 (IL 6 )及可溶性IL 6信号传导链 (IL 6Rβ ,也称gp130 )的交叉反应性 ;采用加入 回收法对检测方法的准确性进行鉴定 ,并绘制标准工作曲线 ,然后测定正常人及多发性骨髓瘤患者血清中可溶性IL 6Rα的含量。结果 建立的可溶性IL 6Rα免疫放射检测方法的灵敏度为 10ng/ml,具有良好线性关系的检测范围是 10~ 4 0 0ng/ml,与IL 6及可溶性gp130 (sgp130 )无交叉反应性 ,加入重组可溶性IL 6Rα的回收率在 92 %~ 10 8%之间。正常人血清中可溶性IL 6Rα的含量为 (81 96± 7 2 3)ng/ml,多发性骨髓瘤患者血清中可溶性IL 6Rα的含量为 (2 37 5 8± 70 96 )ng/ml,明显高于正常对照组 (P <0 0 1)。结论 该检测方法能够对血液中可溶性IL 6Rα进行?
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中华检验医学杂志
2003年07期

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