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生物学
TPO基因修饰的基质细胞对巨核系细胞的定向扩增作用
目的 研究TPO基因修饰的基质细胞对CD34+ 造血细胞向巨核系细胞定向增殖分化的影响。方法 将TPOcDNA构建到pBabe pura中 ,通过“乒乓转染法”获得产高滴度逆转录病毒载体的包装细胞 ;利用所获的病毒上清转染基质细胞HFCL ,用Northernblot检测细胞中TPO基因的表达 ,并利用TPO依赖株检测上清中的TPO活性 ;以未转基因的HFCL为对照 ,将CD34+ 造血细胞在TPO基因修饰的HFCL支持下扩增 ,用流式细胞仪检测扩增细胞中表型为CD34+ CD41+ 和表型为CD41+ CD6 1+ 细胞的比例。结果 基质细胞HFCL能够有效表达外源性TPO基因 ,在HFCL TPO培养上清中有 0 75ng ml水平的TPO活性 ;并且在HFCL TPO支持下 ,CD34+ 造血细胞经过 7d扩增后 ,CD34+ CD41+ 细胞的比例为 (13 7± 2 0 ) % ,HFCL为 (6 5± 1 8) % (P <0 0 1) ;CD41+ CD6 1+ 细胞的比例为 (11 9± 0 7) % ,略高于HFCL的 (10 6± 1 5 ) % (P >0 0 5 )。结论 基质细胞能够有效表达外源性TPO基因和其蛋白 ,而且TPO基因修饰的基质细胞能显著促进CD34+ CD41+ 巨核祖细胞的扩增 ,但对较成熟的CD41+ CD6 1+ 巨核细胞影响不明显
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中华放射医学与防护杂志
2001年05期
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