慢病毒转染自杀基因后联合更昔洛韦治疗卵巢上皮性癌的实验研究
山东大学齐鲁医院妇产科
,山东大学齐鲁医院妇产科
,山东大学齐鲁医院妇产科
,山东大学齐鲁医院妇产科
,北京大学病理生理学教研室
,Royal Children′s Hospital,Brisbane 250012济南,250012济南,250012济南,250012济南,Australia
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宋莉 孔北华 刘春生
目的 探讨以抗Ⅰ型粘蛋白单链抗体 (anti MUC1)为靶向的慢病毒高效转染自杀基因后联合更昔洛韦 (GCV)对Ⅰ型粘蛋白阳性 (MUC1+ )卵巢上皮性癌细胞的靶向性基因治疗。方法 包装以anti MUC1为靶向的慢病毒 ,介导单纯疱疹病毒胸苷激酶 (HSV tk)基因转染卵巢上皮性癌细胞株SKOV3(MUC1+ )及正常成纤维细胞GF(MUC1-) ,荧光显微镜下观察转染效果。聚合酶链反应 (PCR)、逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)技术鉴定HSV tk基因在靶细胞 (SKOV3及GF)中的整合转录结果。光学显微镜观察GCV作用后细胞形态变化 ;用四甲基偶氮唑蓝 (MTT)法测定GCV的体外杀伤效应。结果 荧光显微镜下观察到以anti MUC1为靶向的慢病毒可有效转染SKOV3细胞 ,PCR、RT PCR均证明HSV tk基因已在靶细胞SKOV3中整合且转录表达 ;而在GF细胞中未见HSV tk基因的整合及转录表达。光学显微镜下观察到HSV tk基因转录后的细胞在GCV作用后出现明显形态变化 ;MTT法显示GCV对转染HSV tk基因后的SKOV3细胞有显著杀伤作用 ,其半数抑制浓度为 0 10mg/L。结论 以anti MUC1为靶向的慢病毒可将HSV tk基因高效、靶向性转染MUC1+ 卵巢上皮性癌细胞 ,联合应用GCV可高效、靶向性杀伤MUC1+ 卵巢上皮性癌细胞
机 构:
山东大学齐鲁医院妇产科
,山东大学齐鲁医院妇产科
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,北京大学病理生理学教研室
,Royal Children′s Hospital,Brisbane 250012济南,250012济南,250012济南,250012济南,Australia;