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畜牧与动物医学
H9亚型禽流感病毒HA1基因的克隆表达及其生物学活性的初步分析
根据GenBank已发表序列设计引物,通过RT-PCR成功获得了H9亚型禽流感病毒北京分离株A/Chicken/Beijing/1/96(H9N2)的HA1片段,经序列分析HA1片段与其他已发表序列同源性为95%~98%。将HA1片段克隆入pET-28a的多克隆位点构建重组质粒pET28-H9HA1并转化宿主菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达,经SDS-PAGE电泳及Western blot分析证实,H9HA1片段得到表达,并且表达的蛋白带分为42Ku和23Ku两条。血凝实验和血凝抑制实验表明原核表达的HA1蛋白不具备血凝活性,其阳性血清不能引起血凝抑制。交叉反应实验证实原核表达的重组蛋白能与禽流感病毒H9亚型单特异性血清反应,而与禽流感病毒H5、H7亚型以及其他禽传染病病原微生物单特异性血清无交叉反应。说明表达的蛋白具有良好的反应原性和特异性,有开发成为H9亚型禽流感检测试剂的可能。
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中国预防兽医学报
2006年06期

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