手机知网 App
24小时专家级知识服务
打 开
畜牧与动物医学
猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF2基因的表达及其单克隆抗体的制备
将猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)CH-1a株的GP2蛋白基因进行截短修饰后,克隆于pGEX6p-1载体中,转化大肠杆菌,并进行诱导表达。经SDS-PAGE分析发现,融合表达的蛋白rtGP2大小约40Ku,Western blot分析证实。表达的融合蛋白rtGP2能被PRRSV阳性血清所特异性识别。收获融合表达的rtGP2,免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,分别以表达的融合蛋白rtGP2和GST蛋白作为包被抗原,通过间接ELISA方法对融合细胞的上清液进行检测,结果获得了1株能稳定分泌抗rtGP2蛋白抗体的杂交瘤细胞株,将其命名为26D8,利用PRRSV感染的Marc-145细胞进行间接免疫荧光检测结果发现,所获得的单克隆抗体能与PRRSV感染细胞产生特异性免疫荧光。亚型鉴定结果显示,该单克隆抗体为IgG1型,其轻链均为K链。本研究中融合表达的rtGP2蛋白及其单克隆抗体的获得,将为今后深入研究PRRSV GP2蛋白的功能与特性提供有益帮助。
手机阅读本文
下载APP 手机查看本文
中国预防兽医学报
2006年06期

搜 索