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农作物
利用CRISPR/Cas9技术创制高效抗除草剂水稻
【目的】培育抗除草剂品种在水稻育种中具有重要意义,利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,突破传统育种局限,以黑龙江优质粳稻品种松粳22、龙粳46和绥粳18为材料,编辑乙酰乳酸合酶ALS基因,创制具有抗除草剂特性的水稻材料,为水稻抗除草剂育种奠定数据和材料基础。【方法】利用CRISPR/Cas9技术,以乙酰乳酸合酶ALS为靶基因,构建单碱基突变载体pH-nCas9-PBE-ALS,以松粳22、龙粳46和绥粳18为转化材料,利用农杆菌介导的转化获得转基因植株,通过对转基因植株的突变位点测序结合除草剂喷施试验,鉴定基因型及表型。【结果】分子水平检测获得ALS~(S627N)突变植株10株,ALS~(S627N)且~(1884)G-A但第628位氨基酸未改变突变植株1株,ALS~(S627N/G628E)突变植株1株,相较于野生型,以上三类突变植株均具有较强抗除草剂特性。【结论】利用CRISPR/Cas9基因编辑技术获得具有抗除草剂特性、能够稳定遗传、不含转基因标记的纯合株系,为抗除草剂水稻育种提供了基础材料。
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中国水稻科学
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