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肿瘤学
Skp2-siRNA构建及其对食管癌细胞Eca-109 p27和Bcl-2蛋白表达的影响
目的:研究siRNA抑制Skp2基因在食管癌细胞中表达,探讨Skp2在肿瘤发生过程中的作用。方法:在Skp2基因编码区选择4个RNAi作用位点,体外合成前体DNA链,复性后连入逆转录病毒载体pSUPER-retro(pRS),转染包装细胞PT67,收集含病毒颗粒的培养上清感染食管癌Eca-109细胞,经嘌呤霉素筛选并扩大培养后形成稳定克隆。流式细胞仪检测细胞凋亡情况,RT-PCR和免疫印迹法检测Eca-109细胞内Skp2 mRNA、p27和Bcl-2表达。结果:与正常细胞和空载细胞相比,筛选得到的2个克隆细胞Skp2 mRNA表达水平下降(P<0.01),p27表达增高(P<0.05),Bcl-2表达降低(P<0.05),细胞凋亡增加(P<0.05)。结论:Skp2 siRNA促进食管癌细胞凋亡与p27上调有关。
领 域:
关键词:
Skp2RNAi食管癌p27Bcl-2
格 式:
PDF原版;EPUB自适应版(需下载客户端)
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湖北医药学院学报
2011年01期
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