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生物学
抗大肠杆菌的新型溶菌酶的设计及表征
大肠杆菌是常见致病菌,对多种抗生素已产生耐药性,因此,需要开发新型抗菌剂用于预防及治疗大肠杆菌感染.然而,大肠杆菌独特的细胞外膜结构可阻止多种抗菌剂进入菌体发挥作用.为提高抗菌剂的跨膜杀菌性能,选取T4噬菌体编码的T4溶菌酶,在其N端融合不同种类的细胞穿透肽,并对融合蛋白进行重组表达.细胞壁降解实验及碘化丙啶染色实验表明,融合了细胞穿透肽的T4溶菌酶保留了其催化活性,同时具有穿膜特性.杀菌实验证明,阳离子型细胞穿透肽Pc及两亲型细胞穿透肽Pa与T4溶菌酶的融合可极大提高酶对大肠杆菌的跨膜杀菌活性,且低浓度EDTA的辅助可进一步提高融合酶的杀菌效果.其中,对于初始菌浓为10~6 CFU/mL的Top10菌株,联合使用0.35 μg/mL的Pa-T4L融合酶与0.3 mM EDTA,可在室温条件下于3 h内杀灭94%的菌体.研究结果可为针对革兰氏阴性菌的抗菌剂设计提供新思路.
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陕西科技大学学报
2021年04期
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