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基础医学
甲型肝炎病毒滴度检测方法的优化与验证
目的对优化后的甲型肝炎病毒滴度检测方法进行验证。方法分别使用甲型肝炎病毒滴度检测的常规方法(每个细胞培养瓶中加入胰酶消化,收集后经超声破碎、氯仿抽提、聚乙二醇6000浓缩等步骤,收获病毒。滴定期间病毒在35℃吸附4 h,中间轻摇2次)和优化方法(在每个细胞培养瓶中加入1%Triton X-100 1 mL,置35℃培养箱中30~40 min,收获病毒。滴定期间病毒在35℃吸附1.5 h,中间轻摇1次)进行滴度检测,同时对优化后的方法进行包括重复性、中间精密性(准确性)及特异性(专属性)的方法学验证,并使用SPSS 20.0统计学软件对试验数据进行统计分析。结果不同吸附时间的病毒增殖培养实验病毒滴度3次检测结果均在8.33~8.50之间,显示优化方法与常规方法一致。优化方法的重复性验证中,取6批样品,分别检测3次,检测结果差异均无统计学意义(P1_((第1次与第2次))=0.694,P2_((第2次与第3次))=0.694,P3_((第1次与第3次))=1.000,P>0.05);中间精密性(准确性)验证中,2组实验人员分别使用常规方法和优化方法进行病毒滴度检测,其检测结果差别较小,组间差异无统计学意义(P=0.599,P>0.05);特异性(专属性)验证中,用常规检测方法及优化后的检测方法同时检测6批样品,其检测结果差异无统计学意义(P=0.203,P>0.05)。结论甲型肝炎病毒滴度检测优化方法可以代替常规方法进行滴度检测。
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微生物学免疫学进展
2021年03期
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