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化学
基于超高效液相色谱-串联质谱的股骨头坏死组织外泌体脂质代谢组学分析
股骨头坏死(ONFH)是一种可导致股骨头塌陷进而需要接受全髋关节置换的疾病。外泌体作为一种细胞间交流的方式,在一系列生理和病理过程中起着至关重要的作用,已在疾病的诊断和治疗中发挥独特作用。该研究利用非靶向代谢组学方法,探讨股骨头坏死组织外泌体内的脂质代谢特征,阐释股骨头坏死时机体发生的脂质代谢变化。该研究采用超速离心的方法,对股骨头坏死组织的外泌体进行了分离富集,并使用动态光散射(DLS)、蛋白质免疫印迹和透射电子显微镜(TEM) 3种方法鉴定外泌体。采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)结合多变量统计分析识别股骨头坏死外泌体的脂质代谢谱。采用主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)对差异表达的外泌体脂质代谢物进行多变量统计分析。在外泌体中检测到18种明显改变的脂质代谢物,包括丙烯醇酯类、脂肪酸酯类、甘油酯类及其衍生物。通过代谢分析网站进行通路分析,从而确定受影响的代谢通路并进行可视化。代谢通路分析显示外泌体内的甘油磷脂代谢和鞘脂代谢改变最为明显,鞘脂和甘油磷脂之间的不平衡导致脂肪毒性损伤,这与常见代谢性疾病的病理生理学有关。同时,甘油磷脂与细胞增殖、分化和凋亡之间具有相关性,甘油磷脂比例的变化可以反映脂质代谢的紊乱。外泌体内的脂质代谢变化可能在一定程度上反映了ONFH疾病的代谢变化。ONFH外泌体脂质代谢组学分析可有助于探索坏死骨组织外泌体中的脂质代谢变化和受影响的脂质代谢通路。
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