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一般化学工业
酿酒酵母PDC5基因的缺失对2-苯乙醇合成的影响及相关代谢改造
该文研究了酿酒酵母中编码丙酮酸脱羧酶的基因PDC5的缺失对2-苯乙醇合成的影响,并将其应用于2-苯乙醇高产菌株的代谢改造策略。首先利用CRISPR/Cas9双质粒敲除体系构建pdc5△突变株,通过优化过的培养条件进行摇瓶发酵,发现基因PDC5的缺失能够促进酵母合成2-苯乙醇。分别表达芳香族转氨酶Aro8p和Aro9p,发现在缺失Aro9p的突变株中过表达Aro8p能够促进2-苯乙醇的合成。由此构建了重组菌株RM59-810(pdc5△aro9△P_(TPI)-ARO8-T_(TT) P_(TPI)-ARO10-T_(TT)),在6.7 g/L L-苯丙氨酸培养基中培养120 h后2-苯乙醇的产量为3.85 g/L,摩尔转化率为0.67 mol/mol,是对照菌株的1.33倍,得率为0.5 g/g L-苯丙氨酸。该文为加强酿酒酵母合成2-苯乙醇的能力提供了一种新的代谢工程改造策略,为研究丙酮酸脱羧酶Pdc5p可能存在的调控作用提供了依据。
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食品与发酵工业
2021年16期
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