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降解黄曲霉毒素B_1的乳酸片球菌重组多铜氧化酶学性质
主要对1株乳酸片球菌Pediococcus acidilactici 7_4中的多酮氧化酶(multicopper oxidase, MCO)基因CueO进行重组表达和降解黄曲霉毒素B_1(Alfatoxin B_1,AFB_1)的能力测定。通过基因工程的手段将CueO基因克隆连接到pET-28a(+)中,并转化到大肠杆菌(Escherichia coli)中进行异源表达,得到可溶性表达的重组蛋白。并进一步研究了温度、pH和底物浓度等因素对重组蛋白降解AFB_1的影响以及降解产物的细胞毒性。结果表明,重组多铜氧化酶降解AFB_1的最佳介体为丁香醛(syringaldehyde, SA),最适pH为7.0,最适温度为37℃,该酶K_m=1.99×10~(-3)μmol,V_(max)=11.31 pmol/(min·mg),重组CueO对AFB_1的降解产物对肝细胞的毒性明显降低。
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食品与发酵工业
2021年13期
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