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化学
来源于Dictyoglomus sp.NZ13-RE01的纤维二糖差向异构酶酶学性质和乳果糖制备研究
为高效制备纤维二糖差向异构酶,用于乳果糖生产,将来源于网团菌属Dictyoglomus sp. NZ13-RE01的纤维二糖差向异构酶基因引入到载体pET-28a中,构建重组质粒pET-28a-NZ13-CE并转化表达宿主E.coli BL21(DE3),得到生产菌株BL21(DE3)-V1。该菌株在摇瓶中经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside, IPTG)诱导24 h后得到最高酶活力为0.53 U/mL的发酵液,在7.5 L发酵罐中高密度发酵,表达酶活力提升了8.1倍,达到4.30 U/mL发酵液。通过镍离子亲和层析柱纯化重组酶,研究NZ13-CE的酶学性质:该酶的最适反应温度为80℃,最适pH为8.0,分子质量为45.5 kDa, 80℃下重组酶的活性半衰期为182 min,催化乳糖至乳果糖的最高转化率为52.5%,且依匹乳糖占总糖含量仅为9%。研究结果表明,NZ13-CE酶具有工业化生产乳果糖的应用潜力。
领 域:
化学
格 式:
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食品与发酵工业
2021年13期
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