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生物学
重组人融合基因Nm23-H1/HbFGF的构建及其在大肠杆菌中表达的研究
根据Nm2 3 H1与HbFGFcDNA序列 ,人工合成一段中间核酸序列 ,将它分别与Nm2 3 H1cDNA的上游引物及HbFGFcDNA的下游引物组成两对引物 ,通过PCR(聚合酶链式反应 )构建出融合基因Nm2 3 H1/HbFGF ,将其定向克隆于质粒载体 pBV2 2 0上 ,经诱导 ,SDS PAGE分析 ,表达产物分子量为 34kD ,表达量占菌体总蛋白的14% ,表达产物以包涵体形式存在 ,ELISA和Western印迹表明包涵体具有Nm2 3 H1和HbFGF抗原性 ,然后对包涵体进行变性、复性及纯化处理 ,取纯化产物进行定性和生物活性分析 ,结果证明纯化产物具有Nm2 3 H1和HbFGF的抗原性及生物活性。以上实验为今后进一步研究融合基因Nm2 3 H1/HbFGF在真核细胞中的抑癌、致癌性质打下了基础。
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生物工程学报
2000年05期
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