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中药学
白藜芦醇对钛颗粒诱导小鼠巨噬细胞形成的破骨细胞数量及F-actin环面积影响观察
目的观察白藜芦醇对钛颗粒诱导小鼠巨噬细胞株RAW264. 7形成的破骨细胞数量及F-actin环面积影响,并探讨其机制。方法将小鼠巨噬细胞株RAW264. 7分为Sham组、Vehicle组、Low-Res组、Mid-Res组、HighRes组,Sham组加入完全培养基,Vehicle组加入钛颗粒+完全培养基,Low-Res组加入钛颗粒+完全培养基+白藜芦醇(1μmol/L),Mid-Res组加入钛颗粒+完全培养基+白藜芦醇(10μmol/L),High-Res组加入钛颗粒+完全培养基+白藜芦醇(15μmol/L)。各组细胞培养5天后,采用TRAP染色法检测各组破骨细胞数,采用鬼笔环钛染色法检测各组破骨细胞F-actin环面积,采用Realtime-PCR法检测各组细胞中TNF-α、IL-1βmRNA,采用ELISA法检测各组细胞中TNF-α、IL-1β蛋白,采用Western blotting法检测各组细胞p-p65、p-IκB蛋白。结果 Vehicle组可观察到较多体积较大、酒红色、内含多个细胞核的破骨细胞,而应用不同浓度白藜芦醇干预后,破骨细胞数随着药物浓度的增加而减少; Sham组、Vehicle组、Low-Res组、Mid-Res组、High-Res组破骨细胞数分别为0、(145. 31±7. 87)个、(129. 63±4. 12)个、(85. 51±3. 65)个、(69. 76±5. 63)个,其中Vehicle组和Low-Res组破骨细胞数相比,P>0. 05,其余组间相比,P均<0. 05。Vehicle组可观察到少量较大的F-actin环,Low-Res组、Mid-Res组的F-actin环较Vehicle组略有减少,High-Res组多核细胞明显减少; Sham组、Vehicle组、Low-Res组、Mid-Res组、High-Res组F-actin环面积分别为0、(3 642. 31±987. 01)μm2、(3 265. 75±871. 98)μm2、(2 497. 45±712. 61)μm2和(1 741. 81±716. 07)μm2,组间相比,P均<0. 05。Low-Res组、Mid-Res组、High-Res组细胞中TNF-αmRNA、IL-1βmRNA、TNF-α蛋白、IL-1β蛋白、p-p65蛋白、p-IκB蛋白相对表达量或表达水平均低于Vehicle组,且降低程度与白藜芦醇浓度有关。结论白藜芦醇呈浓度依赖性对钛颗粒诱导小鼠巨噬细胞株RAW264. 7形成的破骨细胞数量及F-actin环面积产生抑制作用,其抑制作用的机制与NF-κB信号通路有关。
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山东医药
2020年21期

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