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神经病学
同型半胱氨酸经DNA甲基化对局灶性脑缺血大鼠大脑皮质区神经发生的影响
目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)干预通过DNA甲基化途径对于局灶性脑缺血大鼠大脑皮质区神经干细胞(NSCs)增殖分化的影响。方法将36只健康雄性成年清洁级Sprague Dawley(SD)大鼠完全随机分为假手术组、大脑中动脉闭塞(MCAO)模型组(MCAO组)、Hcy+MCAO组,每组12只。在MCAO建模手术之前的7 d内,假手术组与MCAO组腹腔注射等渗盐水[5 ml/(kg·d)],Hcy+MCAO组注射2%Hcy溶液[5 ml/(kg·d)]。采用改良Longa法构建MCAO模型。在MCAO模型建立后第5天开始,连续3 d注射5-溴-2-脱氧尿嘧啶[BrdU,50 mg/(kg·d)]标记新生成的神经细胞。MCAO手术后7 d,苏木素-伊红染色观察大脑皮质区的病理变化。分别在手术后7 d和14 d采用免疫荧光双标双皮质素(DCX)/BrdU、神经元核蛋白(NeuN)/BrdU检测内源性NSCs的增殖和分化情况,采用免疫荧光双标DCX/5-甲基胞嘧啶(5mC)和NeuN/5mC检测大脑皮质DNA甲基化水平。结果 3组大鼠大脑皮质区正常神经细胞数量差异有统计学意义(F=49.55,P<0.01),MCAO组正常神经细胞数量[(54±10)个/视野]明显少于假手术组[(99±13)个/视野],Hcy+MCAO组正常神经细胞数量[(32±8)个/视野]明显少于MCAO组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。MCAO组皮质区DCX~+/BrdU~+、NeuN~+/BrdU~+、DCX~+/5mC~+和NeuN~+/5mC~+数量[分别为(7.8±1.1)、(9.3±0.9)、(8.3±0.5)和(9.7±1.8)个/mm~2]较假手术组均增多[分别为(0.5±0.5)、(0.5±0.5)、(1.8±0.7)、(2.2±0.7)个/mm~2;均P<0.05],Hcy+MCAO组上述阳性细胞数量[分别为(3.7±0.8)、(2.8±0.7)、(2.5±0.5)和(2.5±1.0)个/mm~2]均较MCAO组少(均P<0.05)。结论 Hcy水平升高可能降低MCAO大鼠大脑皮质区DNA甲基化水平并抑制其神经发生。
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中国脑血管病杂志
2021年09期
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