手机知网 App
24小时专家级知识服务
打 开
植物保护
葡萄霜霉病菌环介导等温扩增检测体系的建立
建立了葡萄霜霉病菌(Plasmopara viticola)环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测体系,为葡萄霜霉病的早期诊断和预测预报提供依据。根据葡萄霜霉病菌的rDNA-ITS全长基因序列设计合成了7对引物,建立并优化了葡萄霜霉病菌LAMP反应体系。利用该检测体系对包括P.viticola在内的14种常见植物病原真菌的基因组进行LAMP扩增,验证所建立体系的特异性,并对灵敏性进行评价。使用优化后的检测体系对田间发病叶片的总DNA基因组进行扩增,确认了所建立的检测体系的实用性。通过对比7对引物的特异性,筛选出1对特异性良好的引物。LAMP最佳反应条件为:以PVITFIP-1/PVITBIP-1和PVITF3-1/PVITB3-1为引物,反应体系中Bst DNA聚合酶含量为0.32 U·μL~(-1),在62℃反应60 min可以检出葡萄霜霉病菌DNA,其灵敏度为0.3 ng·μL~(-1)。初步在田间使用该技术,可以检测到葡萄霜霉病菌,说明所建立的体系具有一定的实用性。构建的葡萄霜霉病菌LAMP检测体系高效,特异性强,可以用于检测田间的葡萄霜霉病菌。
领 域:
格 式:
PDF原版;EPUB自适应版(需下载客户端)
0 101
手机阅读本文
下载APP 手机查看本文
河南农业大学学报
2020年06期
相似文献
图书推荐
相关工具书

搜 索