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基础医学
抗阿尔茨海默病重组蛋白疫苗的克隆、表达和免疫学鉴定
目的:制备抗阿尔茨海默病的重组蛋白疫苗。方法:将β淀粉样蛋白42肽N端表位Aβ1-15基因,通过来源于破伤风毒素的辅助性T细胞表位多肽TTP基因片段,与大肠杆菌L-门冬酰胺酶Ⅱ(AnsB)基因的C末端融合,构建表达质粒pET28 a-AnsB-TTP-Aβ1-15。转化至E.coliBL-21,TBYE培养基(Kanr)培养,乳糖诱导表达,通过渗透休克、DEAE52-cellu lose和Sepha-dex G-100柱层析制备融合蛋白rAnsB-TTP-Aβ1-15,通过酶活力和抗原性测定鉴定融合蛋白。结果:获得的融合蛋白rAnsB-TTP-Aβ1-15保留了AnsB 71%的催化活力,具有与抗Aβ1-42抗体特异性结合的能力。结论:获得了在AnsB多聚酶分子表面呈现有Aβ1-15表位的融合蛋白rAnsB-TTP-Aβ1-15,为抗阿尔茨海默病疫苗研究奠定了基础。
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东南大学学报(医学版)
2006年04期
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