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生物学
可溶性嵌合补体抑制分子的构建及表达
目的 制备能抑制补体活化的 2个关键环节 (C3 C5转化酶和MAC的形成 )的一种新型、高效补体抑制剂。方法 先设计引物 ,然后通过PCR技术扩增重组可溶性CD46 CD55 CD59嵌合分子cDNA片段 ,重组于pSecTagA真核表达载体上 ,分别利用COS 7细胞和中国仓鼠卵巢 (Chinesehamsterovary ,CHO )细胞进行表达 ,并用抗人CD46多克隆抗体及抗人CD55、CD59单克隆抗体对表达产物进行westernblotting鉴定。结果 DNA测序证实 ,前端带有小鼠IgGκ链前导序列 ,后端融合有编码 6个组氨酸碱基的CD46 CD55 CD59嵌合分子cDNA片段的阅读框完整。免疫印迹结果显示 ,表达的重组蛋白分别能与抗人CD46多克隆抗体和抗人CD55、CD59单克隆抗体结合。结论 成功构建并在真核细胞内表达了重组可溶性CD46 CD55 CD59嵌合分子 ,为进一步研制和开发新一代多功能、多靶点补体抑制剂奠定了基础。
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免疫学杂志
2002年06期

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