小鼠Semcap2分子的克隆、表达与抗血清制备
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王华 高杰英 彭虹
目的 获得小鼠Semcap 2蛋白 ,并对其功能进行初步研究。方法 用DNA重组法构建了mSemcap 2cDNA的原核表达质粒pGEX KG mSemcap 2。将重组质粒转入大肠杆菌DH5α,经 0 .3mmol LIPTG在 37℃条件下诱导 3 .5h,行SDS PAGE检测。用 8mol L尿素溶解的包涵体作为免疫原免疫家兔制备多抗。结果 蛋白表达量约占细菌总蛋白的 1 5 %。多抗效价达 1∶1 0 2 4 0 0 ,此多抗可以与重组蛋白及真核转染细胞中的蛋白发生很好的抗原抗体反应。结论 小鼠Semcap 2在大肠杆菌中得到高效表达 ,其抗体的制备为深入研究mSemcap 2提供了材料
机 构:
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