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神经病学
线粒体钙单向转运体在无镁致痫海马神经元凋亡中的作用
目的:探讨线粒体钙离子单向转运体(MCU)在无镁致痫海马神经元凋亡中的作用及可能的机制。方法:将海马神经元分为空白对照组、无镁诱导组、Ru360(MCU特异性抑制剂)组、Spermine(MCU特异性激动剂)组、Mito-Q(线粒体特异性抗氧化剂)组。空白对照组用正常的含镁细胞外液处理3 h。无镁诱导组用无镁细胞外液处理3 h。Ru360组、Spermine组和Mito-Q组分别用5μmol/L的Ru360、10μmol/L的Spermine、500 nmol/L的Mito-Q处理1 h,然后用无镁细胞外液处理3 h,再维持培养24 h。取空白对照组、无镁诱导组、Ru360组、Spermine组神经元,分别采用MTT法、TUNEL染色法、钙离子荧光探针Rhod-2染色法、线粒体荧光探针MitoSOX染色法和Western blot法检测存活率、凋亡率、线粒体钙离子浓度、线粒体ROS生成水平及内质网应激相关蛋白GRP78、CHOP和Caspase-12的表达。取空白对照组、无镁诱导组、Mito-Q组神经元,检测线粒体ROS生成水平及GRP78、CHOP和Caspase-12的表达。结果:与空白对照组比较,无镁诱导组神经元存活率下降,凋亡率增加,线粒体钙离子浓度及ROS生成水平升高,GRP78、CHOP和Caspase-12表达增加(P<0.05)。与无镁诱导组比较,Ru360组神经元存活率增加,凋亡率降低,线粒体钙离子浓度、ROS生成水平和GRP78、CHOP、Caspase-12蛋白表达降低(P<0.05);而Spermine组各指标变化与Ru360组相反(P<0.05)。与无镁诱导组相比,Mito-Q组线粒体ROS生成水平和GRP78、CHOP和Caspase-12表达降低(P<0.05)。结论:MCU可能通过调节氧化应激介导的内质网应激反应,从而在无镁致痫海马神经元凋亡中发挥重要作用。
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郑州大学学报(医学版)
2020年04期
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