目的建立龙胆泻肝丸中龙胆苦苷含量测定的液相色谱-质谱联用(HPLC-MS/MS)检测方法。方法样品经甲醇提取,采用乙腈和水系统为流动相进行梯度洗脱,质谱电喷雾离子源正离子模式下采用MRM多反应监测,定量测定龙胆苦苷。结果龙胆苦苷在10～1000 ng·mL~(-1)浓度之间的范围线性关系良好,相关系数(r)为0.9999,检出限为0.1 mg·kg~(-1),定量限为0.3 mg·kg~(-1),回收率在91.2～98.4%之间,相对标准偏差小于2.0%。结论该方法准确、快速、灵敏度高,可很好的应用于龙胆泻肝丸中龙胆苦苷的测定。