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生物学
鲶鱼抗菌肽ParasinⅠ原核表达载体的构建与鉴定
目的构建鲶鱼抗菌肽(ParasinⅠ)原核表达载体。方法根据ParasinⅠ氨基酸序列及大肠埃希菌偏爱密码原则设计并合成ParasinⅠ基因寡核苷酸片段,将其与表达载pGEX-4T-1经限制性核酸内切酶双酶切后连接,转化至大肠杆菌BL21,挑取阳性菌落,抽提重组质粒并鉴定,IPTG诱导表达融合蛋白,亲和层析纯化后SDS-PAGE分析表达和纯化结果,测定抗菌活性。结果重组体插入基因序列测定证实与设计的ParasinⅠ序列一致。表达产物经SDS-PAGE蛋白电泳分析,在相对分子质量28KD处出现融合蛋白条带。抑菌试验表明,融合蛋白分子凝血酶切产物对革兰阳性的金黄色葡萄球菌ATCC25938有抑制作用。结论成功构建了ParasinⅠ成熟肽原核表达载体,为进一步研究其抗菌、抗肿瘤作用奠定了基础。
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国外医药(抗生素分册)
2011年06期

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