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农作物
小麦中一个ADF基因克隆与表达分析
肌动蛋白在植物防御真菌侵染过程有重要作用,有众多基因调节肌动蛋白表达变化,肌动蛋白解聚因子(Actin-depolymerizing factor,ADF)是其中一个重要调节因子。利用同源序列设计引物进行PCR扩增后,通过电子克隆技术得到一个新的TaADFcDNA全长,在小麦望水白和Alondra两个品种中分别得到一个827bp和818bp的核苷酸序列,开放阅读框均为145aa,预测编码蛋白大小为13.14kD。编码氨基酸的保守性分析发现均有4个保守位点,分别为磷酸化位点(phosphorylation site)、肌动蛋白结合位点(actin binding site)、核定位信号(nuclear location signal)和F-Actin结合位点(F-Actin binding site)。将此基因与其他几个物种的ADF蛋白保守性和亲缘关系进行分析表明,该基因氨基酸序列非常保守,与水稻等作物亲缘关系密切。经过Real-Time PCR分析其在小麦各个组织的表达,叶中表达量最高,根中表达量最低。利用禾谷镰刀菌侵染后分析在抗赤霉病病品种望水白和感病品种Alondra中穗部的表达发现,两者ADF在72h内均上调表达。
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分子植物育种
2011年05期
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