载脂蛋白E通过激活ERK/MMP9信号通路促进子宫内膜癌细胞的迁移
目的 研究载脂蛋白E(APOE)在子宫内膜癌转移中的具体作用及分子调控机制。方法 子宫内膜癌HEC-1B细胞常规培养,空白对照组siRNA以及APOE靶向的siRNA转染子宫内膜癌HEC-1B细胞,以及采用空载质粒和APOE过表达质粒转染子宫内膜癌HEC-1B细胞,分为空白对照组siCtrl、siAPOE组、空载质粒组、APOE过表达质粒组。利用划痕实验和Transwell实验检测子宫内膜癌细胞的迁移能力,通过MTT实验及流式细胞术验证APOE对子宫内膜癌细胞增殖能力的影响,使用Hoechst染色法检测干扰APOE后HEC-1B细胞的凋亡情况,采用qPCR、Western blotting观察ERK/MMP9信号通路的变化;通过免疫组化的方法分析APOE的表达与子宫内膜癌组织分化程度的相关性。结果 划痕实验和Transwell小室实验结果显示,与空白对照组相比,转染了siAPOE的HEC-1B细胞的迁移能力均明显下降(P<0.05)。与空载质粒组相比,过表达APOE能显著促进子宫内膜癌细胞HEC-1B的迁移能力(P<0.05)。MTT实验及流式细胞术结果显示APOE对细胞增殖无影响。Hoechst染色实验结果表明干扰APOE后HEC-1B细胞的凋亡能力没有受到影响。Western blotting结果显示敲低APOE能够降低子宫内膜癌细胞中MMP9的蛋白表达水平(P<0.05),而过表达APOE能使细胞内MMP9的蛋白水平升高(P<0.05);U0126能够抑制过表达APOE对MMP9的促进作用(P<0.05)。免疫组化结果显示,APOE在子宫内膜癌组织的表达水平比癌旁组织高。结论 APOE在子宫内膜癌组织中呈高表达,APOE可通过影响ERK的磷酸化,促进子宫内膜癌细胞中MMP9的表达,促进子宫内膜癌细胞的迁移。