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预防医学与卫生学
孕鼠DEHP暴露对子代神经行为的影响及其机制
目的:探讨围生期邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)暴露对小鼠神经行为的影响,阐明DEHP影响神经行为的可能机制。方法:选用受孕的ICR小鼠32只,随机分为3个不同剂量DEHP和玉米油对照组,于怀孕第3天起至孕17 d止,每天分别给予低剂量(10 mg?kg~(-1))、中剂量(50 mg?kg~(-1))、高剂量(250 mg?kg~(-1)) DEHP和玉米油灌胃,在仔鼠出生后观察其神经发育学指标,并在7周龄后进行神经行为学检测;利用Western blotting法检测仔鼠大脑前额叶皮层组织中丝切蛋白(cofilin)和P21蛋白激活激酶1 (Pak1)蛋白表达水平。将体外培养的Neuro-2A细胞分为不同剂量DEHP组和二甲基亚砜(DMSO)对照组,分别用1 nmol?L~(-1)、10 nmol?L~(-1)、1μmol?L~(-1)DEHP和DMSO孵育,在0、6、12、24和48 h利用细胞划痕实验观察细胞迁移能力,在相差显微镜下拍照观察细胞突起生长的情况。结果:与玉米油对照组比较,不同剂量DEHP组新生仔鼠神经发育学指标差异无统计学意义(P>0.05);与玉米油对照组比较,中剂量DEHP组雌性仔鼠自由探索新环境的能力降低(P<0.01);与玉米油对照组比较,中剂量DEHP组仔鼠前额叶皮层组织中cofilin蛋白表达水平降低(P<0.05),但Pak1蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。细胞划痕实验,与DMSO对照组比较,不同剂量DEHP组细胞孵育12 h后,细胞迁移速率均降低(P<0.05);1μmol?L~(-1)DEHP组孵育6 h后细胞平均突起长度均缩短(P<0.05),孵育48 h后有突起细胞百分比降低(P<0.05)。结结论论:ICR小鼠在孕期暴露于50 mg?kg~(-1)及以上剂量的DEHP可导致仔鼠神经行为异常,1μmol?L~(-1)DEHP孵育Neuro-2A细胞12 h后明显抑制细胞迁移和突起生长能力,其机制可能与DEHP抑制细胞骨架调控蛋白cofilin的表达有关。
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吉林大学学报(医学版)
2021年02期
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