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根癌农杆菌介导苹果愈伤组织遗传转化体系的优化
【目的】以‘王林’苹果愈伤组织为转化研究的材料,在已经建立的遗传转化基础上,优化根癌农杆菌介导的‘王林’愈伤组织的遗传转化系统。【方法】在遗传转化的过程中,通过对根癌农杆菌的侵染时间、共培养以及抗性的选择,优化遗传转化体系并且增加转化效率。【结果】选择生长20 d的愈伤组织,在根癌农杆菌OD_(600)=0.8时侵染20 min,共培养3 d、转入卡那霉素30 mg/L和头孢噻肟250 mg/L的培养基上进行筛选,可显著提高遗传转化效率。【结论】将McmiR399d作为标记基因进行转化,优化苹果‘王林’愈伤组织的遗传转化系统,从而得到过表达和沉默的McmiR399d‘王林’愈伤组织。
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北京农学院学报
2021年01期

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