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肿瘤学
TEF-1δ基因真核细胞稳定表达系统的构建与鉴定
目的 :构建TEF 1δ (mousetranslationelongationfactor 1δ)的稳定表达系统。方法 :采用磷酸钙介导转染技术和G4 18细胞筛选法 ,以 pcDNA3.1/V5 His TOPO为表达载体 ,构建了TEF 1δ转基因CHO和COS7细胞系 ,WesternBlot分析与鉴定表达蛋白。结果 :在 10株转染和经G4 18反复筛选的CHO细胞系中 ,有 3株 (编码为COH pcDNA3.1 TEF 1δ # 3,# 6 ,# 14 )具有高效稳定表达的TEF 1δ编码蛋白质 (Mr约 31× 10 3 ) ,其余CHO细胞株的TEF 1δ蛋白质表达相对较弱或无表达。在 4株转染和经G4 18反复筛选的COS7细胞系中 ,4株细胞 (编码为COS7 pcCDNA3.1 TEF 1δ # 4 ,# 8,# 14和 # 17)均有高效稳定的TEF 1δ编码蛋白表达 ,相应的无转染组及载体对照组的CHO和COS7细胞均无TEF 1δ蛋白质表达。结论 :这两类TEF 1δ转基因哺乳动物细胞稳定表达系统已成功构建与鉴定 ,该表达系统的建立对于TEF 1δ这一新基因的生物学功能研究 ,尤其是镉的致癌作用与致癌机制的研究有重要应用价值。
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癌变.畸变.突变
2002年03期

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