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肿瘤学
TRAP结合液体闪烁计数法半定量检测端粒酶活性
本文介绍一种端粒酶检测方法,该方法是将 T R A P法在 P C R 过程中引入3 Hd C T P,结合液闪计数cpm 半定量分析端粒酶活性。应用该方法检测端粒酶阳性的 C N E2 细胞和部分组织标本及 R Nase A 或加热预处理后的对照标本,并与 T R A P 法相比较,结果显示 C N E2 细胞端粒酶阳性,10 个 C N E2 细胞中仍可检到端粒酶,组织样品的端粒酶与文献值基本一致;放射性活性计数(cpm) 与 C N E2 细胞抽提液中端粒酶活性具有良好的线性关系;用 R Nase A 或加热处理后标本为阴性,cpm 值接近阴性对照;批内和批间变异度分别为11 .68 % 和2099 % 。该方法不需使用聚丙烯酰胺凝胶电泳( P A G E) 和放射自显影,简便快速,当天可观察结果,并具有灵敏度高、特异性和批内重复性好之特点。
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癌变.畸变.突变
1999年05期
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