摘要
Abstract
1 引言 1.1 降解纤维素的微生物及其酶系 1.2 纤维素酶的理化特性 1.2.1 纤维素酶的作用机理 1.2.2 纤维素酶的多形性 1.2.3 分子量、分子结构及等电点 1.2.4 纤维素酶最适pH值及酶活的影响因子 1.2.5 纤维素酶的诱导性 1.3 纤维素酶的发酵生产 1.4 纤维素酶的分离纯化 1.5 纤维素酶的应用 1.5.1 食品工业 1.5.2 洗涤剂 1.5.3 造纸 1.5.4 纺织 1.5.5 饲料 1.5.6 医药 1.5.7 能源工业 1.5.8 目前纤维素酶在我国实际运用中的意义及问题 1.6 产纤维素酶微生物菌种选育研究进展 1.6.1 常规理化诱变 1.6.2 基因重组技术 1.6.3 基因定位突变技术 1.6.4 细胞融合技术 1.7 本课题的研究思路和意义
2 材料和方法 2.1 材料 2.1.1 生化试剂 2.1.2 其他化学试剂 2.1.3 常用储存液及配法 2.1.4 培养基配方 2.1.5 仪器设备 2.2 实验方法 2.2.1 筛选培养基的配制方法 2.2.2 产纤维素酶菌株的筛选 2.2.3 菌株形态的显微观察 2.2.4 菌株生理生化特征测定 2.2.5 纤维素酶的活力测定 2.2.6 蛋白质含量的检测方法 2.2.7 纤维素酶的分离纯化 2.2.8 聚丙烯酰胺凝胶电泳 2.2.9 反应温度对纤维素酶活力的影响和热稳定性 2.2.10 pH对纤维素酶活力的影响 2.2.11 纤维素酶Km测定 2.2.12 影响酶活性因子的测定 2.2.13 酶促降解纤维素产物鉴定
3 结果和分析 3.1 菌株筛选结果 3.2 菌体形态及运动性观察结果 3.3 生理生化特征测定结果及分析 3.4 葡萄糖和牛血清白蛋白标准曲线的测定结果 3.5 纤维素酶分离纯化 3.6 温度和pH值对纤维素酶活性的影响 3.7 纤维素酶Km的测定结果 3.8 纤维素酶活性的影响因子分析 3.9 酶产物薄层层析结果分析
4 讨论 4.1 产胞外纤维素酶菌的筛选 4.2 纤维素酶活性测定 4.3 细菌纤维素酶的分离纯化 4.4 酶学特性的研究 4.5 细菌纤维素酶的SDS-PAGE和Natire-PAGE 4.6 酶产物的鉴定 4.7 本课题获得的细菌纤维素酶的研究前景
结论
致谢
参考文献