摘要
Abstract
第一章 文献综述 1.1 甾类化合物概述 1.2 甾类化合物的微生物转化 1.2.1 甾类化合物微生物转化的特点 1.2.2 甾类化合物微生物转化反应类型 1.3 新技术在甾类药物微生物转化中的应用 1.3.1 固定化细胞转化技术 1.3.2 原生质体转化技术 1.3.3 双水相体系中的转化技术 1.3.4 混合培养转化技术 1.3.5 顺序发酵 1.3.6 超临界流体中的转化技术 1.3.7 有机介质中甾体化合物的微生物转化 1.3.8 外加作用因子对甾体转化的影响 1.4 甾体化合物C_(1,2)微生物脱氢研究进展 1.4.1 具有甾体C_(1,2)脱氢能力的微生物 1.4.2 甾体C_(1,2)微生物脱氢反应机理 1.4.3 简单节杆菌甾体C_(1,2)脱氢酶的酶学性质 1.5 简单节杆菌C_(1,2)脱氢动力学模型 1.5.1 微生物生长和酶形成模型 1.5.2 氢化可的松的溶解速率方程 1.5.3 酶反应动力学方程 1.5.4 结晶过程的速率方程 1.5.5 底物浓度的变化方程 1.5.6 发酵液体系中底物和产物的浓度变化速率方程 1.6 本论文的研究对象和主要研究内容 1.6.1 倍他米松的用途 1.6.2 HMPDD的微生物脱氢反应过程 1.6.3 本论文的研究内容 参考文献
第二章 材料与方法 2.1 实验材料 2.1.1 试剂 2.1.2 菌种 2.1.3 培养基 2.1.4 发酵条件及转化条件 2.1.5 主要实验仪器及设备 2.2 有关参数分析方法 2.2.1 葡萄糖含量的测定 2.2.2 生物量的测定 2.2.3 甾体脱氢酶活力测定 2.2.4 HMPDD转化率的测定 2.3 双波长比吸光度法测定HMPTD含量的分析方法建立 2.3.1 实验方法 2.3.2 分析结果 2.4 HMPDD和HMPTD在不同有机溶剂中的溶解度测定 2.4.1 实验方法 2.4.2 测定结果 2.5 小结 参考文献
第三章 优良菌株的选育及产酶条件优化 3.1 引言 3.1.1 菌种选育 3.1.2 简单节杆菌甾体脱氢酶的产酶条件研究 3.1.3 本章的研究内容 3.2 材料与方法 3.2.1 材料 3.2.2 实验方法 3.3 结果与讨论 3.3.1 不同保藏菌株的HMPDD脱氢性能考察 3.3.2 菌株的分离纯化 3.3.3 菌株2-76-14的形态特征 3.3.4 菌种选育 3.3.5 甘油冷冻管的菌种保藏效果 3.3.6 产酶培养基组成的优化 3.3.7 简单节杆菌产酶条件研究 3.3.8 间歇培养过程中简单节杆菌生长及产酶动力学曲线 3.4 小结 参考文献
第四章 简单节杆菌催化HMPDD脱氢动力学研究 4.1 引言 4.2 材料与方法 4.2.1 菌种 4.2.2 培养基 4.2.3 菌悬液的制备 4.2.4 HMPDD的转化反应 4.2.5 粒径大小以及粒径分布的测量 4.2.6 酶活力的测定 4.2.7 HMPDD脱氢转化率的测定 4.3 结果与讨论 4.3.1 投料方式对HMPDD粒径分布的影响 4.3.2 甾体脱氢酶稳定性考察 4.3.3 不同菌体量对反应初速度的影响 4.3.4 底物浓度对脱氢反应初速度的影响 4.3.5 不同初始底物浓度的转化过程曲线 4.3.6 动力学方程的建立 4.4 小结 附录 参考文献
第五章 水相中简单节杆菌催化HMPDD脱氢工艺条件研究 5.1 材料与方法 5.1.1 材料 5.1.2 实验方法 5.2 结果与讨论 5.2.1 菌体生长特性曲线 5.2.2 投料方法和底物增溶对脱氢转化率的影响 5.2.3 摇瓶转化条件的研究 5.2.4 不同外源电子受体对转化的影响 5.2.5 添加不同代谢中间体对HMPDD转化的影响 5.3 HMPDD的C_(1,2)微生物脱氢新工艺研究 5.3.1 洗涤细胞转化工艺 5.3.2 培养液稀释转化新工艺 5.3.3 超声波处理对HMPDD转化的影响 5.4 小结 参考文献
第六章 HMPDD微生物脱氢反应的放大 6.1 引言 6.2 材料与方法 6.2.1 材料 6.2.2 方法 6.2.3 HMPD转化产物的分析 6.2.4 生物反应器 6.3 结果与讨论 6.3.1 10L罐发酵结果 6.3.2 300L罐间歇发酵结果 6.3.3 3T罐间歇发酵结果 6.3.4 HMPDD转化产物的结构分析 6.4 小结 参考文献
第七章 两相体系中简单节杆菌催化HMPDD的C_(1,2)脱氢反应研究 7.1 引言 7.2 材料与方法 7.2.1 菌种 7.2.2 培养基 7.2.3 试剂 7.2.4 主要试验仪器及设备 7.2.5 实验方法 7.3 结果与讨论 7.3.1 两相体系的构建 7.3.2 两相体系中HMPDD脱氢反应的影响因素 7.4 小结 参考文献
第八章 两相体系中固定化细胞催化的HMPDD C_(1,2)脱氢反应 8.1 引言 8.2 材料与方法 8.2.1 菌种 8.2.2 培养基 8.2.3 试剂 8.2.4 主要仪器设备 8.2.5 实验方法 8.3 结果与讨论 8.3.1 不同细胞固定化制备方法的比较 8.3.2 海藻酸钙包埋细胞固定化条件的研究 8.3.3 固定化细胞增殖时间对HMPDD转化率的影响 8.3.4 增殖培养基中KH_2PO_4浓度对固定化细胞转化力的影响 8.3.5 两相体系中转化条件对HMPDD转化率的影响 8.4 小结 参考文献
第九章 结论与建议 9.1 结论 9.2 建议
攻读博士学位期间发表的论文
致谢