摘要
Abstract
第一章 文献综述 1 橘小实蝇 1.1 分布及危害 1.2 发生规律 1.3 防治措施 1.3.1 植物检疫 1.3.2 农业防治 1.3.3 化学防治 1.3.4 引诱剂防治 2 昆虫肠道微生物 2.1 昆虫肠道微生物的种类 2.2 昆虫肠道微生物对宿主昆虫的作用 2.2.1 为宿主提供必需的营养 2.2.2 参与氮素循环 2.2.3 解毒和防御作用 3 实蝇共生菌或肠道微生物 4 16S rDNA的PCR-DGGE分析 4.1 16S rDNA基因简介 4.2 DGGE的基本原理 4.3 DGGE的应用 5 研究的目的意义及创新点 5.1 研究的目的及意义 5.2 本研究的创新点 6 研究的内容及技术路线 6.1 本课题的研究内容 6.2 本研究的技术路线
第二章 橘小实蝇成虫肠道细菌分子多态性分析 1 材料与方法 1.1 实验材料 1.1.1 橘小实蝇成虫 1.1.2 培养基、常用试剂及抗生素的配制 1.1.3 常用仪器和设备 1.1.4 引物序列 1.2 实验方法 1.2.1 橘小实蝇成虫肠道解剖 1.2.2 肠道微生物总DNA提取 1.2.3 细菌16S rDNA片段的扩增 1.2.4 细菌16S rDNA片段的克隆 1.2.5 PCR反应产物的变性梯度凝胶电泳(DGGE)分析 1.2.6 DGGE分离后PCR产物的电泳条带分析及测序 1.2.7 序列统计分析与系统发育树构建 1.2.8 序列登录号 2 结果与分析 2.1 橘小实蝇成虫解剖 2.2 肠道细菌16S rRNA基因片段的PCR扩增 2.3 阳性克隆的鉴定及PCR再扩增 2.4 三个种群肠道细菌基因文库构建及序列分析 2.4.1 三个种群肠道细菌基因文库构建 2.4.2 三个细菌16S rDNA文库的多样性分析 2.4.3 三个细菌16S rDNA文库的系统发育分析 2.4.4 三个细菌16S rDNA文库的差异显著性分析 3 讨论
第三章 橘小实蝇成虫肠道可培养细菌群落结构分析 1 材料与方法 1.1 实验材料 1.2 研究方法 1.2.1 橘小实蝇成虫的解剖 1.2.2 成虫肠道可培养细菌的分离、培养 1.2.3 细菌DNA抽提及16S rRNA片段的扩增 1.2.4 PCR产物的DGGE电泳分析 1.2.5 DGGE分离后的PCR产物的电泳条带分析及测序 1.2.6 序列统计分析与系统发育树构建 1.2.7 序列登录号 1.2.8 肠道可培养细菌的菌落形态观察 1.2.9 肠道可培养细菌的生理生化实验 2 结果与分析 2.1 肠道可培养细菌16S rRNA基因片段的PCR扩增 2.2 可培养细菌的DGGE电泳及序列分析 2.3 可培养细菌的系统发育分析 2.4 可培养细菌的纯培养菌落特征 2.5 可培养细菌的生理生化鉴定 2.6 可培养细菌的菌种名称 3 讨论
第四章 橘小实蝇成虫肠道细菌对寄主的引诱作用研究 1 材料与方法 1.1 供试菌种 1.2 研究方法 1.2.1 供试菌种对橘小实蝇的室内和野外引诱实验 1.2.2 引诱实验的数据分析 2 结果与分析 2.1 室内引诱效果分析 2.2 野外引诱效果分析 3 讨论
第五章 橘小实蝇成虫肠道细菌对寄主寿命和死亡率的影响研究 1 材料与方法 1.1 供试菌种 1.2 研究方法 1.2.1 供试菌种对橘小实蝇的生理功能实验 1.2.2 实验数据的统计分析 2 结果与分析 2.1 肠杆菌科细菌和蜡样芽孢杆菌饲喂对橘小实蝇寿命和死亡率的影响 3 讨论
参考文献
附录
致谢