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畜牧与动物医学
口蹄疫三价重组鸡痘病毒疫苗分子设计及其构建
本研究针对我国口蹄疫(foot-and-mouth disease,FMD)流行情况,利用计算机软件模拟分析,构建了口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)复合多表位基因工程疫苗表达盒OAAT。该表达盒以O型、A型FMDV结构蛋白 VPI全基因和Asia Ⅰ型FMDV两个基因拓扑型的结构蛋白VP1基因上的5个抗原表位基因(其中2个抗原表位来源于 FMDVIND63/7株,该毒株与我国新疆分离株属于同一基因拓扑型,其余3个抗原表位来源于FMDVYNBS/58株)作为主要免疫原基因,以非结构蛋白上的2个T2细胞表位基因及结构蛋白上的1个Th2细胞表位基因作为辅助基因。将构建好的表达盒OAAT和猪IL-18基因分别插入到鸡痘病毒表达载体pUTA-16-LacZ复合启动子(ATI-P7.5×20)和单一启动子 (P7.5)下游,构建了携带OAAT表达盒和猪IL-18基因的重组鸡痘病毒转移载体质粒pUTAL-OAAT-IL18。应用脂质体转染法,将重组鸡痘病毒转移载体质粒与282E4株鸡瘟病毒共转染鸡胚成纤维细胞(CEF),经BrdU进行三次加压蚀斑筛选后,以不同代次的细胞mRNA为模板,利用FMDV VPI基因和猪IL-18基因特异引物进行RT-PCR和IFA检测,筛选出 OAAT和猪IL-18基因共表达的重组鸡痘病毒rFPV-OAAT-IL18,该重组鸡痘病毒的构建为新型FMDV活载体疫苗的研究奠定了基础。
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中国畜牧兽医学会2006学术年会论文集(上册)
2006年
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