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阴沟肠杆菌flavocytochrome C基因克隆及序列分析

林海龙;付畅;郑福帅;任南琪

  为了克隆flavocytochrome C,研究其在阴沟肠杆菌产氢代谢中的作用和机制,利用CODEHOP设计阴沟肠杆菌NRRL B-414的flavocytochrome C简并引物,选用引物FlacJ扩增基因组DNA,分别得到约1800bp左右的PCR产物,该产物连接pMD18-T载体,并克隆转化至E.coli DH5α感受态细胞中,经筛选后测序。该基因片段长1740bp,编码579个氨基酸,G+C含量为58.51%,A+T含量为41.49%,其在GenBank注册号为GU565952。推导的FlacJ扩增产物氨基酸序列与Enterobacter cloacae subsp.cloacaeATCC13047的flavocytochrome C蛋白一致性最高达到95%,573个氨基酸编码序列中仅相差28个氨基酸,表明其为阴沟肠杆菌的flavocytochrome C基因。实验结果表明,试验已成功克隆到阴沟肠杆菌的flavocytochrome C的部分基因,不但增加了该基因的资源,也可为其产氢代谢工程研究提供科学依据和工作基础,同时也再次证明采用CODEHOP设计简并引物进行同源家族基因克隆成功率高。……   
[关键词]:CODEHOP;flavocytochrome C;阴沟肠杆菌NRRLB-414
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《中国农学通报2011年18期
[格式]:PDF原版; EPUB自适应版(需下载客户端)