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HLA-C基因真核细胞表达载体的构建、鉴定及表达

李卫党;范丽安

  目的 :构建人白细胞抗原 (HLA C)基因真核细胞表达载体 ,在JAR细胞表面表达 ,并对其功能进行探讨。方法 :用RT PCR从人外周血淋巴细胞的总mRNA中逆转录扩增HLA C的cDNA ,克隆到PBluescriptSK + -噬菌粒中 ;测序鉴定后 ,定向亚克隆到真核细胞表达载体pcDNA3中。经脂质体转染JAR细胞 ,G4 18筛选阳性克隆 ,FACS检测HLA C分子的表达。转染HLA C分子的JAR细胞再与分离的NK细胞进行细胞毒试验。结果 :限制性内切酶酶切和序列分析表明 ,克隆到真核细胞表达载体pcDNA3中的HLA C等位基因是HLA Cw 0 6 0 2 ,该分子在JAR细胞株获得高效表达。直接分离的PBL细胞对JAR细胞以及表达HLA C分子的JAR细胞无细胞毒作用 ;而IL 2活化的NK细胞对这些细胞都有细胞毒作用。结论 :HLA C基因的成功表达为研究HLA C分子与NK细胞受体 (KIR)之间的关系奠定了基础 ,NK细胞对JAR细胞的杀伤可能存在不依赖HLA C分子的机制。……   
[关键词]:HLA;RT-PCR;基因克隆;基因表达
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《中国免疫学杂志2002年11期
[格式]:PDF原版; EPUB自适应版(需下载客户端)