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人可溶性TNF受体(sTNFRI)在大肠杆菌中的表达及其活性鉴定

叶飞;李卓娅;尹丙姣;龚非力;姜晓丹;冯玮;徐勇;熊平

  目的 :构建人可溶性TNF受体I(sTNFRI)基因表达载体 ,并在大肠杆菌中高效表达。方法 :用RT PCR扩增编码人TNFRI胞外段基因片段 ,将其插入到表达载体pET 2 8a ,并转入大肠杆菌进行表达。结果 :在IPTG诱导下 ,转入外源基因的大肠杆菌BL 2 1可高效表达sTNFRI蛋白 ,SDS PAGE显示在 2 7kD处有一特异表达条带 ,其表达量占菌体蛋白总量的 31%。纯化的sTNFRI可有效封闭TNF对L92 9细胞的胞毒效应 ;间接免疫荧光显示它可特异性抑制TNF与靶细胞TNFR的结合。结论 :通过基因工程技术获得了人sTNFRI重组蛋白。……   
[关键词]:可溶性TNF受体;基因表达;胞毒效应
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《中国免疫学杂志2002年11期
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