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5-氮胞苷浓度对体外骨髓间充质干细胞诱导分化为心肌样细胞的影响

程芮;王士雯;曹丰;孟玲;王韫芳;李艳华;李泱;裴雪涛

  目的 探讨不同浓度5-氮胞苷(5-aza)体外诱导小型猪骨髓间充质干细胞(MSCs)向心肌样细胞分化的可能性及其对细胞扩增速度的影响。方法 10 ml骨髓,1.077g/ml Ficoll密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞(MNCs),第2代传代细胞分别加入3,5,10μmol/L浓度5-aza化学诱导24 h,与对照组连续培养4周,细胞爬片免疫荧光法鉴定结蛋白desmin及心肌特异性肌钙蛋白I(cTnI)的表达,电镜观察诱导细胞的超微结构变化。结果 5-aza化学诱导后MSCs形态变长、增大,排列更加紧密、整齐,5和10μmol/L组可见较多的多核细胞,部分管状结构,诱导率分别为36%和31%,无显著性差异;3 μmol/L组上述变化的细胞极少,3种浓度及对照组4周后细胞扩增数量分别为(3.81±0.40)×10~6、(3.76±0.62)×10~6、(3.67±0.80)×10~6及(2.90±0.21)×10~6,10μmol/L组增殖速度明显减慢(P<0.05)。各组诱导后的细胞均未见自发搏动。免疫组化提示desmin及cTnI表达阳性,5和10μmol/L组电镜下出现肌丝样结构、心房颗粒及细胞间的缝隙连接。结论 小型猪MSCs经5、10μmol/L 5-aza化学诱导可分化为心肌样细胞,其中5 μmol/L 5-aza不仅可以诱导心肌样细胞而且对细胞增殖速度影响小。……   
[关键词]:骨髓间充质干细胞;心肌细胞;5-氮胞苷
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《中华老年多器官疾病杂志2005年03期