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HBV DNA转染原代鸭肝细胞初步观察

姚云清;黄爱龙;唐霓;王波;张定凤

  目的 通过观测人HBV DNA在非哺乳动物──鸭肝细胞中的复制和表达水平,探讨人HBV感染与复制的跨种属特异性,为建立人HBV DNA转染跨种属肝细胞模型奠定基础。方法 获取线性HBV DNA并电转染原代鸭肝细胞,电转后48h采用IMX系统检测鸭肝细胞中HBsAg和 HBeAg表达水平,用 Southernblot-ting和dot b1otting检测HBV DNA复制情况。以单纯电击肝细胞为对照。结果 转染组原代鸭肝细胞裂解液中HBsAg为9.10(P/N值≥ 2.1为阳性),HBeAg为阴性;上清液中二者均为阴性。转染组原代鸭肝细胞裂解液dotblotting呈强阳性;转染组肝细胞总 DNA Southern blotting显示约4.0 kb以下分子涂抹带,为游离复制型 HBVDNA,包括 rcDNA、cccDNA与 ssDNA等复制中间体;未见整合型 HBV DNA──高分子区(4.0-24.0 kb)涂抹带。对照组上述指标均为阴性。结论 人HBV DNA能在原代鸭肝细胞中复制和表达,可能为肝细胞内环境依赖性,无严格种属特异性限制。……   
[关键词]:肝炎病毒;乙型;转染;原代鸭肝细胞;复制;肝炎病毒;乙型
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《中华肝脏病杂志2002年01期