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电穿孔对原代大鼠肝细胞生物学性状影响

姚云清;张定凤;罗云;张大志;黄爱龙;周卫平;任红

  目的探讨不同电穿孔条件对原代大鼠肝细胞生物学性状的影响,优化外源基因转染原代肝细胞的条件。方法以低电压 (220~400 V)、高电容(500~ 950μF)单脉冲电击原代大鼠肝细胞后接种培养,分别于 36 h~9d不同时点采用台盼蓝拒染法与 MTT法观测肝细胞活力,并检测肝细胞培养上清液中白蛋白(ALB)、ALT与乳酸脱氢酶 (LDH)含量。以未电穿孔肝细胞为对照组。结果培养 36 h~9 d各组肝细胞存活率均高于90%,贴壁率高于95%。培养36 h肝细胞上清液中ALB、ALT与LDH值,电穿孔B组(220 V,950μF)、C组(400 V, 950μF)明显高于对照组;但 MTT法检测各电穿孔组肝细胞活力与对照组比较差异无显著性。结论该电穿孔条件不影响肝细胞的存活能力,还能促进肝细胞ALB等蛋白的合成与释放,可作为外源基因转染原代肝细胞的优选方法之一。……   
[关键词]:大鼠;电穿孔;生物学;原代肝细胞
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《中华肝脏病杂志2001年03期