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在大肠杆菌中分泌表达水蛭素Ⅲ基因的初步研究

谭树华;吴梧桐;刘景晶

  为实现水蛭素Ⅲ(HV3)基因的分泌表达,设计合成了两对(四条)寡核苷酸链,退火、拼连成L门冬酰胺酶信号肽简并基因,同时利用密码子的简并性在该基因3′端基因内引入了一个NheⅠ限制酶切位点。此外,用PCR技术在HV3基因5′端引入NheⅠ限制酶切位点,利用该酶切位点将信号肽基因与HV3基因进行连接且保护原有阅读框架不变,构建了重组质粒pUCSH,测序结果表明,融合基因核苷酸序列与设计要求完全一致,将该融合基因插入pKK2332中构建成HV3分泌表达质粒pKSH,该质粒在大肠杆菌中表达后,表达产物分泌至细胞膜间质中,膜间质蛋白抽提液抗凝血酶生物活性为1014ATU/ml培养液。……   
[关键词]:分泌表达;信号肽;大肠杆菌;初步研究
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《中国药科大学学报1999年01期
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