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猪流行性腹泻病毒适应Vero细胞培养及以传代细胞毒制备氢氧化铝灭活疫苗免疫效力试验

马思奇;王明;周金法;冯力

  采用在病毒培养液中加5~10μg/ml胰酶的培养方法,将猪流行性腹泻病毒(PEDV)CV_(777)适应于Vero细胞,并传45代.细胞病变规律.经免疫荧光检查阳性,电镜观察可见典型冠状病毒粒子,猪传染性胃肠炎(TGE)免疾荧光检查阴性,猪流行性腹泻(PED)血清可抑制细胞病变(CPE).PEDVCV_(777)毒株11、25、28、40及44代传代毒的毒价分别为10 ̄(3.5)、10 ̄(5.5)、10 ̄(6.5)、10 ̄(7.0)和10 ̄(7.0)TCID_(50)/0.3ml。以11、21及22代的毒10ml头口服接种未吃初乳仔猪,可使之典型发病,免疫荧光及电镜观察均呈阳性.分别以25、28及31代毒0.5ml/头、1ml/头、2ml/头口服接种3日龄仔猪18头.除0.5ml组有1头反应外,均未发病,攻毒试验的总保护率为87.5%,对照组100%发病.以28代毒制备氢氧化铝灭活苗,后海穴位接种,主动免疫组85.19%保护,被动免疫组85%保护,对照组100%及92.3%发病.……