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伪狂犬病病毒Fa株gp63(gⅠ)基因转移载体质粒的构建

张银梅;郭万柱;汪铭书;颜其贵

  用限制性核酸内切酶Sall酶切已缺失gⅠ (gE)和部分gp63 ( gⅠ )的重组质粒PPB7- 1DNA后 ,回收大小约 6 0kb片段 ,经T4 DNA连接酶连接后转化入大肠杆菌DH5α株 ,得到含 gp63片段的转移载体质粒PP63。再以SV4 0早期启动子控制的大肠杆菌 β 半乳糖苷酶 (LacZ)基因作为报告基因 ,将其插入PP63中 gp63基因起始密码子ATG下游的StuⅠ位点 ,在选择培养基中筛选出表达 β 半乳糖苷酶的转化子 ,构建了以gp63为同源序列含LacZ报告基因的转移载体质粒 ,命名为PP63LacZ。在该转移载体质粒中 ,LacZ基因的两端分别与 03kb和 05kb的PRVgp63同源序列相连 ,经酶切、核酸分子杂交技术鉴定 ,结果表明该转移载体质粒的构建是成功的……   
[关键词]:伪狂犬病病毒;转移载体;重组;β-半乳糖苷酶基因
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《畜牧兽医学报2001年04期
[格式]:PDF原版; EPUB自适应版(需下载客户端)