目的:为了探讨RT-PCR用于乙脑临床诊断的可行性。方法:根据乙脑病毒E蛋白基因区设计了3条引物,采用逆转录-半套式-聚合酶链反应(RT-seminested-PCR)方法,从实验室到临床应用上,对该方法的敏感性和特异性、临床检测的可靠性进行了探索,并与IgMELISA捕捉法进行了比较。结果:本方法所用引物的敏感性高,特异性强。在此基础上,检测了47例临床上确诊为乙脑患者的标本(特异性IgM阳性),43例RT-sem-inested-PCR结果为阳性,与IgM检测的符合率为91%。在20例特异性IgM阴性、临床上怀疑为乙脑的患者中,12例RT-seminested-PCR结果为阳性,阳性率为60%。结论:上述结果提示,RT-seminested-PCR用于乙脑患者的临床诊断是可行的,若与IgMELISA捕捉法相结合可进一步提高阳性率。另外,对16例核酸检测阳性的患者进行了追踪检查,结果有14例患者恢复期标本的RNA检测仍为阳性,提示该病毒并未随着症状的消失而立即消失。……
