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胆固醇氧化酶基因的克隆及在E.coli中的表达

王龙刚;邬敏辰;王武

  根据NCBI中报道的BrevibacteriumsterolicumATCC21387胆固醇氧化酶基因序列,采用PCR方法以Brevibacteriumsp.DGCDC-82的基因组为模板,扩增得到了编码胆固醇氧化酶的基因,该基因与来源于BrevibacteriumsterolicumATCC21387的胆固醇氧化酶基因(choB)同源性为98%。将得到的基因定向克隆到pET28a载体中,转化至含有编码argU和proL基因的大肠杆菌BL21-CodonPlus(DE3)-RP中表达。经过IPTG诱导后,经SDS-PAGE检测在约55kD处有一蛋白表达条带,目的蛋白表达量约占总蛋白的16%,经测定酶活为340U/L。……   
[关键词]:Brevibacterium sp.DGCDC-82;胆固醇氧化酶;克隆;原核表达
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《微生物学通报2006年06期
[格式]:PDF原版; EPUB自适应版(需下载客户端)