手机知网 App
24小时专家级知识服务
打 开
手机知网|搜索

一种简单实用的适于大、小质粒的DNA提取方法

徐建国;刘志奇;刘汉明

  以Birabolm和Doly的质粒提取方法为基础,用醋酸铵取代醋酸钠,沉淀染色体DNA和RNA,用异丙醇取代乙醇沉淀质粒DNA,降低了质粒DNA标本中蛋白质和RNA的含量,减少了标本体积。并发现在质粒DNA标本中加入冷异丙醇或冷乙醇后,在-70℃、-20℃、-10℃、4℃和室温下作用,对质粒DNA的回收量无明显影响,在质粒DNA标本中加入冷异丙醇后,在4℃作用0、10、20和30分钟,对质粒DNA的回收量无明显影响。用该方法提取的质粒DNA可直接用于限制性内切酶消化。用该方法提取大肠埃希氏菌、志贺氏菌、耶尔森氏菌的质粒DNA均获成功,适用于提取分子量为140Md的大质粒和分子量为3.23Md的小质粒。……   
[关键词]:质粒DNA提取法;醋酸铵;异丙醇
[文献类型]:期刊
[文献出处]: 《微生物学通报1991年01期